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Molecular Devices 使用CloneSelect Imager系统在半固体培养基中进行单克隆验证

点击次数:443 发布时间:2017-04-25

 简介

生物药品审批的监管标准一直都在不断变化。其中用于细胞系单克隆来源的监管条例驱使我们要在生物药物开发过程中使用更有效的技术或方法。许多研究人员通常使用成像系统(如CloneSelect Imager)在液体培养基中验证单克隆和监控细胞的生长。其实,CloneSelect Imager系统也可以在半固体培养基中对细胞进行成像。细胞在半固体培养基中的位置比较固定,使研究人员可以更加准确地在不同时间点对同一个细胞进行成像。实验室常规方法通常使用有限稀释进行细胞克隆。但是,这种方法使用液体培养基培养细胞,使追踪细胞变得比较困难或不够准确。因为在处理微孔板的过程中,悬浮细胞容易在孔内发生位置移动(Figure1)。不能确保不同时间点成像的 是同一个细胞,从而大大降低单克隆验证的准确性。此外,有限稀释有可能在一个孔内加入多个细胞,需要进行额外多次亚克隆来提高单克隆的概率。使用半固体培养基培养细胞给科研人员提供了一个更快更简单的克隆方法,而且有利于追踪细胞的生长。细胞在半固体培养基中的位置相对定,在常规实验操作过程中细胞位置不会移动,可以生长成独立单个的细胞克隆。所以,可以在同一个孔内种植多个细胞,而且通过不同时间点成像,能够清晰追踪单个细胞的生长情况,提供单克隆的数字验证数据。CloneSelect Imager为研究人员提供了一个在半固体培养基中对细胞进行成像的方法。这个系统使用非侵入性检测方法,无需标记细胞直接进行成像,可以对细胞生长情况进行准确定量;进行单细胞来源克隆验证,确保只选择稳定的单克隆用于下游研究。本文通过实际实验验证CloneSelect Imager在CloneMedia™CHO Growth A半固体培养基中对悬浮CHO-s细胞的成能。这种半固体培养基成份经过专门优化,适合各种CHO细胞系的生长。

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